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标题:Fast DNA KIT 实验操作步骤说明
发布时间:2013-8-15

Fast DNA SampleFastPrep仪器的介绍

FastDNA试剂盒可从广阔的各种来源中快速有效地分离出genomic DNA,配套FastPrep仪器使用。动植物组织、细菌、海藻、真菌和其他许多标本,在40秒内容易被裂解。这个benchtop设备是一种专利性的垂直角度运动,这种运动使得裂解微粒能同时从多方向、同步地碰撞。FastPrep仪器提供一种极其快速、有效、高度可重复匀质化,超过了用酶消化、超声破碎仪、涡旋、混合传统提取方法。标本放在装有Lysing Matrix A的2.0 ml试管中。同时几乎全部的标本很容易用预先填充化合物进行加工,另外,1/4英尺的陶球用来加工坚硬的标本,比如:骨头、软骨和种子。在有CLS专样下,用Lysing Matrix A处理,在FastPrep仪器中将会匀浆化。对植物组织来说, CLS-VF用来和PPS连用。酵母、海藻和真菌在CLS-Y中被裂解。CLS-TC是用来裂解其他所以标本。为了获得最大的柔韧性,试剂会提供所有的缓冲液。裂解之后,标本被离心到pellet debris和lysing matrix。通过硅土基质GENECLEAN程序DNA被纯化。提取的DNA准备用来消化、电泳、PCR和其他任何期望的用途。

适用研究范围

动植物组织、细菌、酵母、藻和真菌中分离基因组试剂盒

试剂盒组成

品名

规格

Lysing Matrix A 

100*2 ml tubes 

1/4 Ceramic Spheres  

100 spheres 

Binding Matrix

66 ml 

Concentrated SEWS-M 

12 ml

DES 

25 ml

CLS-VF

90ml

PPS

25ml

CLS-TC

110ml

CLS-Y

110ml

User manual 

1 each

MSDS 

1 each

Certificate of Analysis

1 each

订购信息:

货号

品名

规格

库存

6540-400

FastDNA® kit 

100prep

现货

实验者需自备的仪器及耗材

FastPrep® Instrument                                (fastprep 仪器)

Microcentrifuge that can freely spin 2.0 ml tubes   (可装载2.0ml管子的离心

Microcentrifuge tubes (2.0 ml and 1.5 ml)           (可装载1.5和2.0ml管子的微型离心

Rotator or low-speed vortex

(Optional) SPIN Filters and Catch Tubes, 100

操作步骤

1.添加标本到Lysing Matrix A管中。

在水中或者是等渗盐溶液中,放置100 - 200 mg组织(新鲜、冰冻、干燥等)或者200 μl细胞悬浮液。对于细菌、酵母、海藻、或者是组织培养细胞是在悬浮液中生长,离心充足的培养体积,以便提供50-100 mg湿重的小球尺寸的标本。(在水或者等渗盐溶液中重新悬浮小球,获得200 μl的最大悬浮体积。)

2.根据下表添加适当的CLS。

Processing Tissue From:  

 Add to Sample Tube: 

Plant tissue 

800 μl CLS-VF and 200 μl PPS 

Animal tissue, cultured cells, insects, bacteria, bone, etc.

1.0 ml CLS-TC

Yeast, algae or fungi

1.0 ml CLS-Y

                                                             

3.在FastPrep仪器中用6.0设置的速度匀质化40秒钟。

4.以14,000转离心5-10分钟到pellet debris。

5.转移600 --700μl的悬浮液到一支2.0 ml微型离心管,加同等体积的Binding Matrix,颠倒混匀。

注释:在和下步之间,全部体积的完全混合,使用一支足够大的试管来提供空间是很重要的。不建议使用圆锥底的试管。在这步一支2.0 ml微型离心管就足够了。

6.在室温的条件下,搅拌器一般搅拌5分钟进行孵育。

注释:一台低速的旋涡机在这步可以用,但是操作必须小心,以免除去DNA。

7.在14,000转离心10秒钟到pellet Binding Matrix,去除上清液(悬浮液)。

8.添加500μl备好的SEWS-M,用吸量管轻轻地吹动液体的力量使小球重新悬浮。

注释:确保酒精加到浓缩的,参看3.1部分。

9. 14,000转离心1分钟,去除上清液。

注释:用旋转式移液器转移重新悬浮的Binding Matrix到另一只旋转式移液器。用14,000 转离心1分钟,去除枪头管里的物质。

10.用14,000转离心10秒钟,用小的吸量管移动剩余液体。

注释:如果用一支,用14,000转离心第二次,用新的干净的试管替代the Catch Tube。

11.在100μl的DES中,通过轻轻地重新悬浮的Binding Matrix洗提DNA。

12.用14,000 转离心1分钟,转移洗提的DNA到干净的微型离心管中。DNA可为下游应用作准备。为延长有效期将它存储在-20°C或者是4°C,直到使用。

注释:用一支吸量管小心转移DNA,以避免转移带有洗提DNA的Binding Matrix微粒,避免shearing。注释:用SPIN移液器,在14,000转离心1分钟,将洗提的DNA放入干净的catch tube。DNA可为下游应用作准备。为延长有效期将它存储在-20°C或者是4°C,直到使用。

 

附:

其它相关试剂盒

货号

英文名称

中文名称

规格

116540800

FastDNA®  Spin Kit For Plant And Animal Tissues

动植物组织DNA试剂盒

100 preps

116560200

FastDNA®  Spin Kit For Soil

土壤DNA试剂盒

50 preps

116570200

FastDNA®  Spin Kit For Feces

粪便DNA试剂盒

50preps

116025050

FastRNA® PRO Blue Kit

细菌RNA提取试剂盒

50 preps

116035050

FastRNA® PRO Red Kit

酵母真菌RNA提取试剂盒

50 preps

116045050

FastRNA® PRO Green Kit

 动植物RNA提取试剂盒

50 preps

116070050

FastRNA® PRO Soil-direct Kit

直接法土壤RNA试剂盒

50 preps

116075050

FastRNA® PRO Soil-indirect Kit

间接法土壤RNA试剂盒

50 preps

116550400

FastPROTEIN™ Blue Matrix

细菌蛋白质提取基质

50x2 ml

116550500

FastPROTEIN™ Blue Matrix

细菌蛋白质提取基质

100x2 ml

116550600

FastPROTEIN™ Red Matrix

酵母蛋白质提取基质

50x2 ml

116550700

FastPROTEIN™ Red Matrix

酵母蛋白质提取基质

100x2 ml

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